熒光濾波片選取的原則是在成像端盡可能讓熒光/發射光透過,同時完全阻擋激發光,獲得最高的信噪比。尤其是對于多光子激發和全內反射顯微鏡的應用,微弱的噪聲也會對成像效果造成很大的干擾,因此對信噪比的要求更高。
通常我們看濾光片的參數一般會看透射率光譜,但往往熒光相對于激發光的強度很弱,選擇濾光片更需要參考阻擋深度光譜圖——OD值。OD值更能直觀地反映濾光片對光的阻擋特性。
在選擇激發濾光片和發射濾光片時,兩者的阻擋深度光譜交點(OD交點)是重要的判斷標準,一般要求寬場光源激發是交點OD值大于5,激光激發時大于OD6,以實現較好的熒光信噪比。